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इम्यूनोल वर्षा के लिए G2038-100ml 100 मिलीलीटर आईपी lysis बफर

विशिष्टता:100 मिलीलीटर
आवेदन:प्रोटीन नमूने तैयार करने के लिए गैर-विनाशकारी स्थितियों के तहत एलवाईएसई कोशिकाएं या ऊतक।
परिवहन और भंडारण:गीले आइस बैग परिवहन; 12 महीने के लिए प्रभावी -20 ℃ पर स्टोर करें।
एमएल:
उपलब्धता स्थिति:
  • G2038-100ml
  • Servicebio

उत्पाद वर्णन

अवलोकन

आईपी ​​Lysate एक lysate है जिसका उपयोग गैर-denaturing परिस्थितियों के तहत प्रोटीन नमूने तैयार करने के लिए कोशिकाओं या ऊतकों को lyse करने के लिए उपयोग किया जाता है। इस लिसेट के साथ ऊतकों या कोशिकाओं के क्लीवेज द्वारा प्राप्त प्रोटीन नमूने पृष्ठ, पश्चिमी ब्लॉट, immunoprecipitation, आईपी), सह-आईपी, चिप (क्रोमैटिन immunopre-cipitation), एलिसा और अन्य प्रयोगों में उपयोग किया जा सकता है।

इस उत्पाद का मुख्य तत्व 25 मिमी ट्राइस-एचसीएल, 150 मिमी एनएसीएल, 1 मिमी ईडीटीए, 1% एनपी -40 और 5% ट्राइटन एक्स -100 हैं। इसे जानवर या पौधे के ऊतक और सेल नमूने पर लागू किया जा सकता है, और इसका उपयोग फंगल या जीवाणु नमूने के लिए भी किया जा सकता है।


Pरद्द करने का नाम

Cपर। नहीं।

Sप्रकाशन

आईपी ​​लीस बफर

G2038-100ml

100 मिलीलीटर

उत्पाद उपयोग

अवयव

G2038-10ml

आईपी ​​लीस बफर

100 मिलीलीटर

उपयोग:

प्रोटीज़ अवरोधक प्रदान किए जाते हैं। उपयोग से पहले आईपी लिसेट को प्रोटीज़ इनहिबिटर के साथ जोड़ा जाना चाहिए। प्रोटीन गिरावट को रोकने के लिए जी 2006, जी 2007, जी 2008, आदि की सिफारिश की जाती है। निम्नलिखित उपयोग में उल्लिखित आईपी lysate का मतलब है कि प्रोटीज़ अवरोधक जोड़े गए हैं।


ऊतक के नमूने के लिए:

1. ऊतक ब्लॉक को रक्त के दाग को हटाने के लिए पूर्व-ठंडा पीबीएस (अनुशंसित जी 4202) से धोया गया था, और फिर छोटे टुकड़ों में कटौती और होमोजेनाइज़र में रखा गया था।

2. कम तापमान पर आईपी लीस बफर और होमोजेनेट की 10 एक्स ऊतक मात्रा जोड़ें (उच्च गति वाले ऊतक पीसने वाले उपकरण केजेड -3-एफ और केजेड-आईआईआई-एफपी का उपयोग करने की सिफारिश की जाती है, जो स्वतंत्र रूप से विकसित और सर्विसबियो द्वारा उत्पादित होती है)। नोट: आईपी lysate की राशि लगभग 50 मिलीग्राम ऊतक के अनुपात में 1 मिलीलीटर lysate के अनुपात में जोड़ा जा सकता है। यदि ऊतक प्रोटीन की सामग्री कम है, तो कच्चे तेल समाधान में प्रोटीन एकाग्रता को बढ़ाने के लिए लिसेट की खुराक को कम किया जा सकता है।

3. homogenate को 1.5 मिलीलीटर अपकेंद्रित्र ट्यूब और oscillate में स्थानांतरित करें। 30 मिनट के लिए बर्फ स्नान, जिसके दौरान पिपेट को बार-बार उड़ाया गया था ताकि प्रत्येक 10 मिनट में ऊतक कोशिकाओं के पूर्ण lysis को सुनिश्चित किया जा सके;

4. 12000 जी नमूने के लिए, इसे 5 मिनट के लिए centrifuged किया जाना चाहिए और सतह पर तैरनेवाला एकत्रित किया जाना चाहिए, जो कुल प्रोटीन समाधान है।

अनुवर्ती नमूने के लिए:

1. कोशिकाओं को पीबीएस के साथ 2-3 बार धोएं, और पिछली बार अवशिष्ट तरल को अच्छी तरह से ब्लॉट करें।

2. 6-अच्छी प्लेट के प्रति अच्छी तरह से 250μl सेल lysate के अनुपात के अनुसार सेल संस्कृति प्लेट और फ्लास्क में आईपी lysate डालो, संस्कृति प्लेट और फ्लास्क को बार-बार हिलाओ, और lysate को 3-5 मिनट के लिए कोशिकाओं के साथ पूरी तरह से संपर्क करें।

3. सेल स्पुतुला के साथ कोशिकाओं को स्क्रैप करें और एक अपकेंद्रित्र ट्यूब में एकत्र करें।

4. 5 मिनट के लिए 12000 ग्राम पर अपकेंद्रित्र और सतह पर तैरनेवाला इकट्ठा करें, जो कुल प्रोटीन समाधान है।

निलंबन सेल के लिए:

1. कोशिकाओं को पीबीएस के साथ 2-3 बार धोएं, और पिछली बार अवशिष्ट तरल को अच्छी तरह से ब्लॉट करें।

2. 6-अच्छी प्लेट के प्रति अच्छी तरह से 250μl सेल lysate के अनुपात के अनुसार सेल संस्कृति प्लेट और फ्लास्क में आईपी lysate डालो, संस्कृति प्लेट और फ्लास्क को बार-बार हिलाओ, और lysate को 3-5 मिनट के लिए कोशिकाओं के साथ पूरी तरह से संपर्क करें।

3. सेल स्पुतुला के साथ कोशिकाओं को स्क्रैप करें और एक अपकेंद्रित्र ट्यूब में एकत्र करें।

4. 5 मिनट के लिए 12000 ग्राम पर अपकेंद्रित्र और सतह पर तैरनेवाला इकट्ठा करें, जो कुल प्रोटीन समाधान है।

Fया जीवाणु या फंगल नमूने

जीवाणु निलंबन के 1.1 मिलीलीटर लिया गया था, सतह पर तैरनेवाला को सेंट्रीफ्यूगेशन द्वारा हटा दिया गया था, और तरल को पीबीएस के साथ एक बार धोया गया था पीबीएस को पूरी तरह से हटा दिया गया था। जितना संभव हो सके बैक्टीरिया को फैलाने के लिए।

2. बैक्टीरिया और lysate अच्छी तरह से मिश्रण करने के लिए धीरे-धीरे 100-200 μl आईपी lysate जोड़ें।

3. 10 मिनट के लिए स्नान, जिसके दौरान बैक्टीरिया के पूर्ण lysy सुनिश्चित करने के लिए पिपेट को बार-बार हर 2 मिनट में उड़ाया गया था।

4.12000 जी को 5 मिनट के लिए सेंट्रीफॉग किया गया था और सतह पर तैरनेवाला एकत्र किया गया था, जो कुल प्रोटीन समाधान था।




टिप्पणियाँ:

1. ऊतक या सेल lysis के दौरान मोटाई दिखाई दे सकती है। पिपेटर को बार-बार उड़ाया जा सकता है या भंवर के उपकरण द्वारा तब तक उड़ाया जा सकता है जब तक कि यह तरल न हो। अगर यह मोटा हो गया है, तो आप एक उचित मात्रा में क्रैकिंग तरल जोड़ सकते हैं।

2. इस अभिकर्मक में प्रोटीज़ अवरोधक नहीं होते हैं। कृपया अपने स्वयं के प्रोटीज़ इनहिबिटर तैयार करें और उपयोग से पहले उन्हें जोड़ें। जी 2006, जी 2007, जी 2008 और हमारी कंपनी के अन्य संबंधित प्रोटीज़ इनहिबिटर की सिफारिश की जाती है।

3. इस उत्पाद के पायरोलिसिस से प्राप्त कुल प्रोटीन समाधान हमारे बीसीए प्रोटीन मात्रात्मक पहचान किट (जी 2026) के साथ संगत है।

4. कृपया ऑपरेशन के दौरान एक प्रयोगशाला कोट और डिस्पोजेबल दस्ताने पहनें।


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