ऑस्टियोक्लास्ट्स धुंधला किट के लिए ट्रैप धुंधला समाधान

सिद्धांत

ट्रैप छः एसिड फॉस्फेटस आइसोजीम्स, प्रकार vi में से एक है। ट्रैप ऑस्टियोक्लास्ट में समृद्ध है, आमतौर पर ऑस्टियोस्लास्ट की पहचान करने के लिए एक संकेतक के रूप में। ओस्टियोक्लास्ट ट्रैप धुंधला विधि के साथ दागदार साइटप्लाज्म में सकारात्मक क्लैरेट-लाल दिखाता है और न्यूक्लियस में नकारात्मक दिखाता है।

पैकेज सामग्री

Pआरक्षण

पर संग्रहीत 12 महीनों में मान्य4 ℃ और अंधेरे स्थिति में रखा।

अभिकर्मकों को पी होना चाहिएपुनःउपयोग से पहले

1. समाधान बी के रूप में चिह्नित सोडियम नाइट्राइट और pararosaniline के बराबर भागों का एक समाधान मिलाएं।

2. एनएपीएचथोल को एन-डिमेथिल फॉर्मामाइड के 1 मिलीलीटर के रूप में चिह्नित, एन-डिमेथिल फॉर्मामाइड में विसर्जित करें।

3. सेते हुए समाधान की तैयारी: एसिटिक एसिड बफर समाधान (18 मिलीलीटर), समाधान बी (1 मिलीलीटर) और समाधान सी (1 मिलीलीटर) अच्छी तरह से अभिकर्मकों को मिलाकर, NAOH / HCL (1 मीटर) द्वारा पीएच = 5.0 को समायोजित करें। पोटेशियम सोडियम टार्टेट (0.282 ग्राम) युक्त ट्यूब में इस प्राप्त मिश्रण समाधान को जोड़ें, अच्छी तरह से हिलाएं और छेड़छाड़ करें। फिर जाल ऊष्मायन समाधान प्राप्त किया।

Prअव्यवस्था

1, डिस्टिल्ड पानी के लिए deparaffinize और पुनर्विचार, कई मिनट के लिए धो लें।

2, 50-90 मिनट के लिए 37 ℃ पर ऊष्मायन समाधान के भीतर स्लाइड सेते हैं।

3, 2-5 मिनट के लिए चलने वाले पानी में धो लें।

4, 1-2 मिनट के लिए हेमेटोक्सिलिन समाधान के साथ काउंटरस्टाइन न्यूक्लियस, हाइड्रोक्लोरिक एसिड में अंतर, और अमोनिया समाधान में नीले रंग में।

5, नियमित विधि के साथ निर्जलीकरण, फिर साफ़ और माउंट करें।

Rतोंअल्ट्स

सकारात्मक एसिड फॉस्फेटस गतिविधि का क्षेत्र क्लेरेट-लाल और न्यूक्लियस नीला है।

टिप्पणियाँ

1, यह धुंधला किट हड्डी के ऊतकों में लागू होती है जिसे ईडीटीए द्वारा निर्णायकित किया गया है। एसिड decalcifying समाधान के पास हड्डी के ऊतकों की एसिड फॉस्फेटस गतिविधि पर प्रतिकूल प्रभाव पड़ता है, इसलिए इस धुंधला समाधान के लिए उपयुक्त नहीं है।

2, धुंधला समाधान में सेते हुए आसुत पानी से स्लाइड धोया जाना चाहिए।

उदाहरण