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Pरिन्की
Feulgen दाग सेल नमूने में गुणसूत्र सामग्री या डीएनए की पहचान करने के लिए हिस्टोलॉजी में उपयोग की जाने वाली एक धुंधला तकनीक है। यह 1-4 ग्लाइकोसिडिक बॉन्ड में डीएनए के एसिड हाइड्रोलिसिस पर निर्भर करता है, जो मुफ्त Aldehyde समूह उत्पन्न करता है। फिर Aldehyde समूह Magenta के साथ बैंगनी-लाल परिसरों के साथ संयुक्त। पैथोलॉजिकल ऊतक (ट्यूमर, ग्रैनुलेशन) में सेल हाइपरप्लासिया के दौरान डीएनए संश्लेषण में उल्लेखनीय वृद्धि हुई है। Feulgen दाग के साथ, वितरण (कुल या फैलाव) और डीएनए की राशि का प्रदर्शन किया जा सकता है।
पैकेज सामग्री
कोड | नाम | आकार |
G1048-1 | 1 एम हाइड्रोक्लोरिक एसिड | 50 मिलीलीटर |
G1048-2 | मैजेंटा समाधान | 50 मिलीलीटर |
G1048-3 | सोडियम मेटाबिसल्फाइट समाधान | 50 मिलीलीटर |
G1048-4 | फास्ट-ग्रीन सॉल्यूशन | 50 मिलीलीटर |
Pआरक्षण
4 महीने में 4 महीने में मान्य℃।
Pरॉकड्र
1, deparaffinize और distilled पानी के लिए अनुभागों को हाइड्रेट करें।
2,पी1 मीटर फिर से गरममें हाइड्रोक्लोरिक एसिड समाधान60 ℃ओवन। गर्म में स्लाइड्स को विसर्जित करें1 मी30 मिनट के लिए हाइड्रोक्लोरिक एसिड, कमरे के तापमान में कुल्ला1 मीहाइड्रोक्लोरिक एसिड, 3 बार के लिए आसुत पानी के साथ धो लें।
3, विसर्जित60-90 मिनट के लिए आवधिक एसिड समाधान में, अंधेरे स्थिति में रखा गया। पानी में न धोएं।
4, आरसोडियम मेटाबिसल्फाइट समाधान के 2 परिवर्तनों में इन्स स्लाइड्स, प्रत्येक 2 मिनट। 5 मिनट के लिए चलने वाले नल के पानी में धोएं।
5, पूर्ण शराब के 3 परिवर्तनों में 10 एस -2 मिनट, निर्जलीकरण के लिए तेजी से हरे रंग के समाधान में कुल्ला।
6, सीएलXylene के 2 परिवर्तनों में कान, 5 मिनट प्रत्येक। राल बढ़ते माध्यम के साथ माउंट।
7、माइक्रोस्कोपी निर्धारण और विश्लेषण के लिए छवियों को एकत्रित करें।
परिणाम
न्यूक्लियस डीएनए बैंगनी-लाल है जबकि साइटप्लाज्म और अन्य तत्व हल्के हरे रंग के हैं।
नकारात्मक नियंत्रण
(1) आसुत पानी के साथ चरण 7, 8, और 9 में हाइड्रोक्लोरिक एसिड को बदलें।
(2) deparaffinize के बाद, 37 पर DNASE (1 मिलीग्राम / मिली) के साथ स्लाइड सेते हैं2 घंटे के लिए ℃.
ऊपर दिए गए दो तरीकों में से किसी एक के साथ सौदा करें, स्लाइड नकारात्मक धुंधला हो रहा है।
Nओट
1, सामान्य फिक्स समाधान बौइन समाधान को छोड़कर वैकल्पिक हैं जिसके परिणामस्वरूप डीएनए के ओवर हाइड्रोलिसिस हो सकता है। तो Bouin समाधान उपयुक्त नहीं है।
2, हाइड्रोक्लोरिक एसिड हाइड्रोलिसिस के लिए बहुत लंबा या छोटा समय दोनों परिणामस्वरूप न्यूक्लियस के पीले दाग में होता है। आम तौर पर, 8 मिनट के लिए हाइड्रोलिसिस अधिकांश ऊतकों के लिए उपयुक्त है। हाइड्रोलिसिस परिणाम के अनुसार समय समायोजित करने की सिफारिश की जाती है।
3, एक उचित सीमा में फास्ट-ग्रीन काउंटरस्टैन का प्रबंधन करें। ओवर-दाग गहरे नीले रंग का कारण बन सकता है या यहां तक कि सकारात्मक परिणामों को भी ओवरलैप कर सकता है।
