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उत्पाद वर्णन
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प्रोटीन सीढ़ी 10 केडीए से लेकर 180 केडीए तक दस पुनः संयोजक प्रोटीन का एक अनुमानित मिश्रण है। तीन अलग-अलग क्रोमोफोर्स प्रोटीन से बंधे होते हैं, जो एक चमकीले रंग की सीढ़ी का उत्पादन करते हैं। प्रोटीन सीढ़ी आसानी से पैक की जाती है और बिना किसी हीटिंग, पतला या अतिरिक्त कम करने वाले एजेंट के उपयोग करने के लिए तैयार होती है। प्रतिष्ठित प्रोटीन के स्पष्ट आणविक भार की बहुत अधिक भिन्नता ~ 5% है।
स्टोरेज बफर: 62.5 मिमी ट्राइस • एच 3 पीओ 4 (पीएच 7.5 पर 25 डिग्री सेल्सियस), 1 मिमी ईडीटीए, 2% (डब्ल्यू / वी) एसडीएस, 10 मिमी डीटीटी, 1 मिमी नैन 3, 33% (वी / वी) ग्लिसरॉल।
महत्वपूर्ण उत्पाद जानकारी ·
प्रोटीन सीढ़ी उबालें मत। ·
प्रोटीन सीढ़ी को 3 महीने तक 4 ºc पर संग्रहीत किया जा सकता है। ·
सटीक प्रोटीन मेगावाट निर्धारण के लिए पेजरुलर ब्रॉड रेंज अस्थिर प्रोटीन सीढ़ी (# 26630) का उपयोग करें।
लोडिंग के लिए सिफारिशें
कुछ मिनटों के लिए कमरे के तापमान पर सीढ़ी को हटाए गए ठोस को भंग करने के लिए। उबाल मत करो!
धीरे-धीरे मिलाएं, लेकिन अच्छी तरह से, समाधान सजातीय है।
एक एसडीएस-पॉलीएक्रियामाइड जेल पर सीढ़ी के निम्नलिखित खंडों को लोड करें: - मिनी जेल के लिए 5 μl प्रति अच्छी तरह से, - बड़े जेल के लिए 10 μl प्रति अच्छी तरह से। पश्चिमी ब्लोटिंग के लिए एक ही वॉल्यूम का उपयोग करें। ऊपर सूचीबद्ध लोडिंग वॉल्यूम 0.75-1.0 मिमी की मोटाई के साथ जैल के लिए अनुशंसित की जाती है। लोडिंग वॉल्यूम को 1.5 मिमी मोटी जैल के लिए दोगुना किया जाना चाहिए।
महत्वपूर्ण लेख ·
प्रेस्टेड प्रोटीन में विभिन्न एसडीएस-पेज-बफर सिस्टम में अलग-अलग संगठन हो सकते हैं। हालांकि, वे एक ही सिस्टम में अस्थिर मानकों के खिलाफ कैलिब्रेटेड होने पर अनुमानित आणविक वजन निर्धारण के लिए उपयुक्त हैं। विभिन्न इलेक्ट्रोफोरोसिस स्थितियों में माइग्रेशन पैटर्न के लिए प्रदान की गई तालिका देखें। ·
कम प्रतिशत वाले जैल (<10%) में, सीढ़ी में निम्न आणविक भार प्रोटीन डाई मोर्चे के साथ माइग्रेट कर सकते हैं। ·
पेजरुलर प्रेस्टीन प्रोटीन सीढ़ी का उपयोग पश्चिमी ब्लोटिंग में सभी सामान्य झिल्ली में किया जा सकता है: पीवीडीएफ, नायलॉन और नाइट्रोसेल्यूलोस। ·
बड़े स्थानांतरण के समय या उच्च स्थानांतरण वोल्टेज बड़े (> 100 केडीए) प्रोटीन के पश्चिमी ब्लोटिंग के लिए आवश्यक हो सकते हैं।
-20 डिग्री सेल्सियस पर स्टोर करें