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सेल के लिए जी 2002-100 मिलीलीटर 100 मिलीलीटर मजबूत रिपा लीस बफर

विशिष्टता:100 मिलीलीटर
उपयोग:कोशिकाओं और ऊतकों का तेजी से lysis।
परिवहन और भंडारण:गीले आइस बैग परिवहन; 4 पर स्टोर करेंऔर प्रकाश से दूर रखें, 18 महीने के लिए मान्य।
एमएल:
उपलब्धता स्थिति:
  • G2002-100ml
  • Servicebio

उत्पाद वर्णन

अवलोकन

रिपा लीस बफर (रिपा लिसिस बफर) कोशिकाओं और ऊतकों के लिए एक पारंपरिक तेज़ एलवाईएसई समाधान है। ऊतकों और कोशिकाओं से प्राप्त प्रोटीन नमूने नियमित पृष्ठ, पश्चिमी, immunoprecipitation (आईपी), सह-आईपी और अन्य प्रयोगों के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है। आरआईपीए क्रैकिंग तरल पदार्थ के कई फॉर्मूलेशन हैं, इसके क्रैकिंग प्रभाव के अनुसार मुख्य रूप से मजबूत में विभाजित है, मध्यम और कमजोर तीन प्रकार। यह उत्पाद रिपा का एक मजबूत क्रैकिंग तरल है। इसके मुख्य घटकों में 50 मिमी ट्राइस-एचसीएल (पीएच 7.4), 150 मिमी एनएसीएल, 1 मिमी ईडीटीए -2 एनए, 1% ट्राइटन एक्स -100, 1% सोडियम डिओक्सिचोलिक एसिड और 0.1% एसडीएस शामिल हैं। यह उत्पाद जानवर या पौधे के ऊतक के लिए उपयुक्त है और सेल नमूने, फंगल या जीवाणु नमूने के लिए भी इस्तेमाल किया जा सकता है।

अवयव

G2002-30ml

G2002-100ml

रिपा लीस बफर (मजबूत)

30 मिलीलीटर

100 मिलीलीटर

उत्पाद उपयोग


उपयोग:

प्रोटीज़ अवरोधक प्रदान किया जाता है। उपयोग से पहले PRIGA LYSATE (मजबूत) को प्रोटीज़ इनहिबिटर के साथ जोड़ा जाना चाहिए। प्रोटीन गिरावट को रोकने के लिए जी 2006, जी 2007, जी 2008, आदि की सिफारिश की जाती है। निम्नलिखित उपयोग में उल्लिखित रिपा लिसेट (मजबूत) का अर्थ है कि प्रोटीज़ अवरोधक जोड़े गए हैं।

ऊतक के नमूने के लिए:

1. ऊतक ब्लॉक को रक्त के दाग को हटाने के लिए पूर्व-ठंडा पीबीएस (अनुशंसित जी 4202) से धोया गया था, और फिर छोटे टुकड़ों में कटौती और होमोजेनाइज़र में रखा गया था।

2. आरआईपीए लीस बफर (मजबूत) की 10 एक्स ऊतक मात्रा और कम तापमान पर homogenate जोड़ें (उच्च गति वाले ऊतक पीसने के उपकरण केज -3-एफ और केजे -3-एफपी का उपयोग करने की सिफारिश की जाती है, जिसे स्वतंत्र रूप से विकसित किया जाता है और सर्विसबियो द्वारा उत्पादित किया जाता है )। नोट: रिपा लिसेट (मजबूत) की मात्रा लगभग 50 मिलीग्राम ऊतक के अनुपात में 1 मिलीलीटर के अनुपात में जोड़ा जा सकता है। यदि ऊतक प्रोटीन की सामग्री कम है, तो कच्चे तेल समाधान में प्रोटीन एकाग्रता को बढ़ाने के लिए लिसेट की खुराक को कम किया जा सकता है।

3. Homogenate को 1.5 मिलीलीटर अपकेंद्रित्र ट्यूब और oscillate में स्थानांतरित करें। 30 मिनट के लिए बर्फ स्नान, जिसके दौरान विंदुक को बार-बार ऊतक कोशिकाओं के पूर्ण lysys सुनिश्चित करने के लिए उड़ा दिया गया था;

4. 12000 जी नमूने के लिए, इसे 5 मिनट के लिए centrifuged किया जाना चाहिए और सतह पर तैरनेवाला एकत्रित किया जाना चाहिए, जो कुल प्रोटीन समाधान है।

अनुवर्ती नमूने के लिए:

1. कोशिकाओं को पीबीएस के साथ 2-3 बार धोएं, और पिछली बार अवशिष्ट तरल को अच्छी तरह से ब्लॉट करें।

2. 6 अच्छी तरह से प्लेट के प्रति अच्छी तरह से 250μl सेल lysate के अनुपात के अनुसार सेल संस्कृति प्लेट और फ्लास्क में ripa lysate (मजबूत) डालो, संस्कृति प्लेट और फ्लास्क को बार-बार हिलाएं, और lysate को 3 के लिए कोशिकाओं के साथ पूरी तरह से संपर्क करें- 5 मिनट।

3. सेल स्पुतुला के साथ कोशिकाओं को स्क्रैप करें और एक अपकेंद्रित्र ट्यूब में एकत्र करें।

4. 5 मिनट के लिए 12000 ग्राम पर अपकेंद्रित्र और सतह पर तैरनेवाला इकट्ठा करें, जो कुल प्रोटीन समाधान है।

निलंबन सेल के लिए:

1. कोशिकाओं को पीबीएस के साथ 2-3 बार धोएं, और पिछली बार अवशिष्ट तरल को अच्छी तरह से ब्लॉट करें।

2. 6 अच्छी तरह से प्लेट के प्रति अच्छी तरह से 250μl सेल lysate के अनुपात के अनुसार सेल संस्कृति प्लेट और फ्लास्क में ripa lysate (मजबूत) डालो, संस्कृति प्लेट और फ्लास्क को बार-बार हिलाएं, और lysate को 3 के लिए कोशिकाओं के साथ पूरी तरह से संपर्क करें- 5 मिनट।

3. सेल स्पुतुला के साथ कोशिकाओं को स्क्रैप करें और एक अपकेंद्रित्र ट्यूब में एकत्र करें।

4. 5 मिनट के लिए 12000 ग्राम पर अपकेंद्रित्र और सतह पर तैरनेवाला इकट्ठा करें, जो कुल प्रोटीन समाधान है।



टिप्पणियाँ:

1. ऊतक या सेल lysis के दौरान मोटाई दिखाई दे सकती है। पिपेटर को बार-बार उड़ाया जा सकता है या भंवर के उपकरण द्वारा तब तक उड़ाया जा सकता है जब तक कि यह तरल न हो। अगर यह मोटा हो गया है, तो आप एक उचित मात्रा में क्रैकिंग तरल जोड़ सकते हैं।

2. इस अभिकर्मक में प्रोटीज़ अवरोधक नहीं होते हैं। कृपया अपने स्वयं के प्रोटीज़ इनहिबिटर तैयार करें और उपयोग से पहले उन्हें जोड़ें। जी 2006, जी 2007, जी 2008 और हमारी कंपनी के अन्य संबंधित प्रोटीज़ इनहिबिटर की सिफारिश की जाती है।

3. ऑपरेशन के दौरान कृपया एक प्रयोगशाला कोट और डिस्पोजेबल दस्ताने पहनें।

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