+86 (027) 5111 3188
उत्पाद वर्णन
उत्पाद वर्णन
यह किट एक सरल और तेज़ 10% एसडीएस-पेज रंग (हरा) जेल तैयारी विधि प्रदान करता है। उपयोगकर्ताओं को केवल जेल तैयार करने के लिए अपने स्वयं के जेल बनाने वाले उपकरण तैयार करने की आवश्यकता होती है, जो जेल-निर्माण प्रक्रिया को बहुत सरल बनाता है। किट में प्रदान की गई ऊपरी जेल (केंद्रित जेल) अभिकर्मक एक रंगीन (हरा) ऊपरी जेल तैयार कर सकता है। हरे रंग की धुंधला किट ऊपरी जेल (केंद्रित जेल, संचित जेल) में स्थिर रूप से मौजूद हो सकती है, और इलेक्ट्रोफोरोसिस (जेल को अलग करने) के साथ निचले जेल में प्रवेश नहीं करेगी, इसलिए हरे रंग के डाई के अतिरिक्त ऊपरी जेल प्रोटीन स्पॉटिंग छेद को स्पष्ट रूप से प्रकट कर सकते हैं , नमूना छेद के मार्जिन का न्याय करना आसान है या यह विकृत या क्षतिग्रस्त है या नहीं, और स्पॉटिंग छेद को प्रोटीन नमूना को सटीक रूप से जोड़ने के लिए सुविधाजनक है। धुंधला किट इलेक्ट्रोफोरोसिस और धुंधला प्रभाव को प्रभावित नहीं करेगी। इलेक्ट्रोफोरोसिस पूरा होने के बाद, ऊपरी परत जेल की पहचान करना और निकालना आसान है, और बाद के पश्चिमी ब्लॉट और अन्य प्रयोगों को प्रभावित नहीं करता है। जेल ब्लॉक की विशिष्ट संख्या जेल की मोटाई और जेल के आकार से संबंधित है।
भंडारण और परिवहन
गीला बर्फ परिवहन;
4 डिग्री सेल्सियस और प्रकाश से दूर, एक वर्ष के लिए मान्य;
संयोजन
अवयव | G2062-50T |
ऊपरी जेल समाधान ए | 50 मिलीलीटर |
ऊपरी जेल समाधान बी (हरा) | 50 मिलीलीटर |
10% कम जेल समाधान ए | 125 मिलीलीटर |
10% कम जेल समाधान बी | 125 मिलीलीटर |
एपी (अमोनियम पर्सल्फेट) | 1 जी (पाउडर) |
उपयोगकर्ता पुस्तिका | 1 पीसी |
कदम
लक्ष्य प्रोटीन के आणविक भार के अनुसार, एसडीएस-पेज लोअर जेल (पृथक्करण जेल) की उचित एकाग्रता का चयन करें, कृपया निम्न तालिका देखें:
एसडीएस-पेज पृथक्करण जेल एकाग्रता | सर्वश्रेष्ठ पृथक्करण सीमा (केडीए) |
6% | 50-250 |
8% | 30-130 |
10% | 20-100 |
12% | 10-60 |
15% | <40 |
2. 10% एपी समाधान तैयार करें: एपी (अमोनियम पर्सुल्फेट) पाउडर के 0.1 ग्राम प्राप्त करें और इसे 1 मिलीलीटर पानी के साथ पूरी तरह से भंग करें। समाधान 4 डिग्री सेल्सियस पर संग्रहीत होने पर 1-2 सप्ताह के लिए मान्य है, और -20 डिग्री सेल्सियस पर संग्रहीत होने पर 3 महीने के लिए मान्य है।
3. प्रयोगात्मक आवश्यकताओं के अनुसार, समान अनुपात में समाधान ए और बी मिश्रण, 10% एपी समाधान की उचित मात्रा जोड़ें, और क्रमशः निचले जेल समाधान और ऊपरी परत जेल समाधान तैयार करें। विभिन्न विनिर्देशों और विभिन्न मोटाई की ग्लास प्लेटों के लिए, ऊपरी जेल की तैयारी की मात्रा और निचले जेल समाधान को बराबर अनुपात में समायोजित किया जा सकता है। एक उदाहरण के रूप में आमतौर पर 8.3 सेमी × 7.3 सेमी जेल प्लेट का उपयोग करके, अनुशंसित तैयारी प्रणाली निम्नानुसार है:
समूह | अवयव | जेल का एकल टुकड़ा (1.0 मिमी मोटाई) | जेल के दो टुकड़े (1.0 मिमी मोटाई) |
निचला जेल समाधान | 10% कम जेल समाधान ए | 2.5 मिलीलीटर | 5 मिलीलीटर |
10% कम जेल समाधान बी | 2.5 मिलीलीटर | 5 मिलीलीटर | |
10% एपी समाधान | 50μl | 100 मिलीलीटर | |
ऊपरी जेल समाधान | ऊपरी जेल समाधान ए | 1 मिलीलीटर | 2 मिलीलीटर |
ऊपरी जेल समाधान बी (हरा) | 1 मिलीलीटर | 2 मिलीलीटर | |
10% एपी समाधान | 20μl | 40μl |
नोट: विभिन्न मोटाई के विभिन्न निर्माताओं और ग्लास प्लेटों के अनुसार, ऊपरी जेल और निचले जेल समाधान की मात्रा बराबर अनुपात में समायोजित की जा सकती है। समाधान में 10% एपी (100 गुना कमजोर पड़ने) जोड़ें और इसे अच्छी तरह मिलाएं।
4. जेल उपकरण तैयार करें और तैयार निचले परत जेल समाधान डालें, और तुरंत तैयार ऊपरी परत जेल समाधान को धीरे-धीरे और समान रूप से जोड़ें (आसुत पानी को निचले परत जेल तरल सतह को सील करने के लिए भी उपयोग किया जा सकता है, 15-30 मिनट बाद तक निचला परत जेल मजबूत करता है, पूर्ण होने के बाद तैयार ऊपरी परत जेल समाधान जोड़ें), कंघी डालें, और उपयोग से पहले इसे ठोस (लगभग 15-30 मिनट) ठोस बनाने के लिए प्रतीक्षा करें।
5. यदि तैयार जेल का उपयोग उसी दिन नहीं किया जा सकता है, तो इसे उपयोग से पहले 1-2 दिनों के लिए 4 डिग्री सेल्सियस पर संग्रहीत किया जा सकता है।
एहतियात
1. Premix में मोनोमर एक्रामाइड है, जो मानव शरीर के लिए हानिकारक है। कृपया ऑपरेशन के दौरान सुरक्षात्मक उपाय करें।
2. यह सुनिश्चित करने के लिए कि नमूना एक ही समय में अलगाव जेल में प्रवेश करता है, जब शीर्ष जेल को सीधे डालना, तैयार शीर्ष जेल समाधान धीरे-धीरे और समान रूप से जोड़ा जाना चाहिए।
3. एपी जोड़ने के बाद जितनी जल्दी हो सके जेल डालो, इसे लंबे समय तक न छोड़ें।
4। जेल के ठोसकरण के तापमान के साथ एक महत्वपूर्ण सकारात्मक सहसंबंध है। समान स्थितियों के तहत, तापमान जितना अधिक होगा, ठोसता दर तेज।