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उत्पाद वर्णन
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यह किट एक साधारण और तेज़ 12% एसडीएस-पेज रंग (हरा) जेल तैयारी अभिकर्मक प्रदान करता है, जो निचले जेल (यानी पृथक्करण जेल) और ऊपरी जेल (जिसे केंद्रित जेल, संचित जेल भी कहा जा सकता है) प्रदान कर सकता है। उपयोगकर्ता को केवल प्रोटीन जैल तैयार करने के लिए जेल बनाने वाले उपकरण तैयार करने की आवश्यकता है। साथ ही, किट में ऊपरी जेल समाधान बी में एक हरे रंग के धुंधला समाधान होता है, जो प्रोटीन स्पॉटिंग छेद को स्पष्ट करता है, नमूना जोड़ प्रक्रिया के दृश्य को महसूस करता है, और नमूना जोड़ दक्षता में काफी सुधार करता है। हरे रंग के धुंधला समाधान ऊपरी जेल में स्थिर रूप से मौजूद हो सकता है, और इलेक्ट्रोफोरोसिस के साथ निचले जेल में माइग्रेट नहीं करेगा, और इलेक्ट्रोफोरोसिस और धुंधला प्रभाव को प्रभावित नहीं करेगा। इलेक्ट्रोफोरोसिस पूरा होने के बाद, ऊपरी जेल को बाद में पश्चिमी ब्लॉट और अन्य प्रयोगों को प्रभावित किए बिना आसानी से पहचाना और हटाया जा सकता है।
यह किट 50 जैल पारंपरिक आकार तैयार कर सकती है, और तैयार जैल की संख्या जेल की मोटाई और जेल के आकार से संबंधित है।
भंडारण और परिवहन
गीला बर्फ परिवहन;
4 डिग्री सेल्सियस और प्रकाश से दूर, एक वर्ष के लिए मान्य;
संयोजन
| घटक संख्या | अवयव | G2063-50T |
| G2063-1 | ऊपरी जेल समाधान ए | 50 मिलीलीटर |
| G2063-2 | ऊपरी जेल समाधान बी (हरा) | 50 मिलीलीटर |
| G2063-3 | 12% कम जेल समाधान ए | 125 मिलीलीटर |
| G2063-4 | 12% कम जेल समाधान बी | 125 मिलीलीटर |
| G2063-5 | एपी (अमोनियम पर्सल्फेट) | 1 जी (पाउडर) |
| उपयोगकर्ता पुस्तिका | 1 पीसी | |
कदम
लक्ष्य प्रोटीन के आणविक भार के अनुसार, एसडीएस-पेज लोअर जेल (पृथक्करण जेल) की उचित एकाग्रता का चयन करें, कृपया निम्न तालिका देखें:
| एसडीएस-पेज पृथक्करण जेल एकाग्रता | सर्वश्रेष्ठ पृथक्करण सीमा (केडीए) |
| 6% | 50-250 |
| 8% | 30-130 |
| 10% | 20-100 |
| 12% | 10-60 |
| 15% | <40 |
10% एपी समाधान तैयार करें: एपी के 0.1 ग्राम (अमोनियम पर्सफेट) पाउडर प्राप्त करें और इसे 1 मिलीलीटर पानी के साथ पूरी तरह से भंग करें। समाधान 4 डिग्री सेल्सियस पर संग्रहीत होने पर 1-2 सप्ताह के लिए मान्य है, और -20 डिग्री सेल्सियस पर संग्रहीत होने पर 3 महीने के लिए मान्य है।
प्रयोगात्मक आवश्यकताओं के अनुसार, समान अनुपात में समाधान ए और बी मिलाएं, उचित मात्रा में 10% एपी समाधान जोड़ें, और क्रमशः निचले जेल समाधान और ऊपरी परत जेल समाधान तैयार करें। विभिन्न विनिर्देशों और विभिन्न मोटाई की ग्लास प्लेटों के लिए, ऊपरी जेल की तैयारी की मात्रा और निचले जेल समाधान को बराबर अनुपात में समायोजित किया जा सकता है। एक उदाहरण के रूप में सामान्य रूप से 8.3 सेमी × 7.3 सेमी जेल प्लेट लेना, अनुशंसित तैयारी प्रणाली निम्नानुसार है:
| समूह | अवयव | जेल का एकल टुकड़ा (1.0 मिमी मोटाई) | जेल के दो टुकड़े (1.0 मिमी मोटाई) |
निचला जेल समाधान | 12% कम जेल समाधान ए | 2.5 मिलीलीटर | 5 मिलीलीटर |
| 12% कम जेल समाधान बी | 2.5 मिलीलीटर | 5 मिलीलीटर | |
| 10% एपी समाधान | 50μl | 100 मिलीलीटर | |
ऊपरी जेल समाधान | ऊपरी जेल समाधान ए | 1 मिलीलीटर | 2 मिलीलीटर |
| ऊपरी जेल समाधान बी (हरा) | 1 मिलीलीटर | 2 मिलीलीटर | |
| 10% एपी समाधान | 20μl | 40μl |
4. जेल उपकरण तैयार करें और तैयार निचले परत जेल समाधान डालें, और तुरंत तैयार ऊपरी परत जेल समाधान को धीरे-धीरे और समान रूप से जोड़ें (आसुत पानी को निचले परत जेल तरल सतह को सील करने के लिए भी उपयोग किया जा सकता है, 15-30 मिनट बाद तक निचला परत जेल मजबूत करता है, पूर्ण होने के बाद तैयार ऊपरी परत जेल समाधान जोड़ें), कंघी डालें, और उपयोग से पहले इसे ठोस (लगभग 15-30 मिनट) ठोस बनाने के लिए प्रतीक्षा करें।
5. यदि तैयार जेल का उपयोग उसी दिन नहीं किया जा सकता है, तो इसे उपयोग से पहले 1-2 दिनों के लिए 4 डिग्री सेल्सियस पर संग्रहीत किया जा सकता है।
एहतियात
1. Premix में मोनोमर Acrylamde है, जो मानव शरीर के लिए हानिकारक है। कृपया ऑपरेशन के दौरान सुरक्षात्मक उपाय करें।
2. यह सुनिश्चित करने के लिए कि नमूना एक ही समय में अलगाव जेल में प्रवेश करता है, जब शीर्ष जेल को सीधे डालना, तैयार शीर्ष जेल समाधान धीरे-धीरे और समान रूप से जोड़ा जाना चाहिए।
3. एपी जोड़ने के बाद जितनी जल्दी हो सके जेल डालो, इसे लंबे समय तक न छोड़ें।
