Ripa Lysis बफर समाधान कमजोर बायोकैमिस्ट्री अभिकर्मक

रिपा लिसिस बफर (कमजोर)

मूल्य $ 18.3 / पीसी

मद संख्या G2033-100ml

उत्पाद का परिचय:

रिपा लीस बफर (रिपा लीस बफर) एक पारंपरिक सेल और ऊतक रैपिड लिसिस बफर है। रिपा लीस बफर के साथ एलिसिस के बाद प्रोटीन नमूना नियमित पश्चिमी, आईपी इत्यादि के लिए उपयोग किया जा सकता है। रिपा लीस बफर के लिए कई सूत्र हैं, जिन्हें प्रभाव के अनुसार मजबूत, मध्यम और कमजोर में विभाजित किया जा सकता है। यह lysate ripa कमजोर lysate है, और इसके मुख्य घटक 50 मिमी ट्राइस-एचसीएल, 150 मिमी एनएसीएल, 1 मिमी ईडीटीए-एनए 2, 1% एनपी -40, 0.25% सोडियम deoxycholeate हैं।
पैकेज सामग्री:

भंडारण की स्थिति: अंधेरे में 4ºC पर स्टोर करें, 12 महीने के लिए मान्य।

निर्देश:

ऊतक के नमूने के लिए:

1. रक्त के दाग को हटाने के लिए ऊतक के टुकड़े ठंड पीबीएस से धोए जाते हैं। छोटे टुकड़ों में कटौती और एक होमोजेनाइज़र में रखें।

2. इस अभिकर्मक को ऊतक की मात्रा में 10 गुना जोड़ें (उपयोग से पहले कुछ मिनट के भीतर प्रोटीज़ अवरोधक जोड़ें) और उच्च गति वाले ऊतक ग्राइंडर के साथ पूरी तरह से homogenize।

3. Homogenate को 1.5 मिलीलीटर अपकेंद्रित्र ट्यूब और हिलाकर स्थानांतरित करें। 30 मिनट के लिए बर्फ के स्नान में, पूर्ण सेल lysis सुनिश्चित करने के लिए बार-बार पिपेट।

1. 5 मिनट के लिए अपकेंद्रित्र at12000g, और सतह पर तैरनेवाला इकट्ठा, जो कुल प्रोटीन समाधान है।

संवर्धित सेल नमूने के लिए:

1. अनुयायी कोशिकाओं के लिए:

A. पीबीएस के साथ 2-3 बार कोशिकाओं को धो लें। पिछली बार शेष तरल को अच्छी तरह से अवशोषित करें।

B. संस्कृति प्लेट और बोतल में 3-5 मिनट के लिए बोतल में इस अभिकर्मक की एक उपयुक्त मात्रा (उपयोग से कुछ मिनट के भीतर प्रोटीज़ अवरोधक जोड़ें) जोड़ें। इस अवधि के दौरान, अभिकर्मकों को पूरी तरह से कोशिकाओं से संपर्क करने के लिए संस्कृति प्लेट और बोतल को बार-बार हिल गया था।

सी। कोशिकाओं और अभिकर्मकों को एक सेल स्क्रैपर के साथ स्क्रैप करें और उन्हें 1.5 मिलीलीटर अपकेंद्रित्र ट्यूब में इकट्ठा करें।

2. निलंबन कोशिकाओं के लिए:

सेंट्रीफ्यूगेशन द्वारा कोशिकाओं को इकट्ठा करें, इस अभिकर्मक के लगभग 250 उल जोड़ें (उपयोग से पहले कुछ मिनट के भीतर प्रोटीज़ अवरोधक जोड़ें) प्रति 6-अच्छी प्लेट कोशिकाएं, और हिलाएं।

30 मिनट के लिए बर्फ स्नान, किस समय के दौरान, 200ul पिपेट के साथ पिपेट हर 10 मिनट में कई बार यह सुनिश्चित करने के लिए कि कोशिकाएं पूरी तरह से ली गई हैं।

1. 5 मिनट के लिए 12000 जी पर अपकेंद्रित्र, और सतह पर तैरनेवाला इकट्ठा, जो कुल प्रोटीन है।

एहतियात:

ऊतक के नमूने के लिए:
इस अभिकर्मक के लगभग 1 मिलीलीटर को हर 50 मिलीग्राम ऊतक के लिए जोड़ा जाता है। उपास्थि और त्वचा जैसे ऊतकों के लिए, प्रोटीन एकाग्रता को बढ़ाने के लिए अभिकर्मकों के खुराक को उचित रूप से कम किया जा सकता है।

संवर्धित सेल नमूने के लिए:

1. सामान्य सेल घनत्व के तहत, प्रत्येक 6-अच्छी प्लेट सेल में लगभग 250ul lysate जोड़ें।

1. यह क्रैकिंग के दौरान मोटा दिखाई दे सकता है। यह तरल होने तक बार-बार pipetted किया जा सकता है। यदि यह मोटा हो गया है, तो आप एक उचित मात्रा में lysate को हिला या जोड़ने के लिए एक भंवर का उपयोग कर सकते हैं।

2. यह अभिकर्मक मानव शरीर के लिए हानिकारक है, कृपया इसे उचित रूप से सुरक्षित रखें।